本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。尊龙凯时推出的Twist转录因子(TWIST) ELISA试剂盒使用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附检测(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔板中,依次加入样品、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育后彻底洗涤。随后,加入底物TMB进行显色,TMB在过氧化物酶的催化下由蓝色转化为黄色,颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法如下:
1. 血清:使用不含热原与内毒素的试管,操作过程中尽量避免细胞刺激。收集血液后,以3000转进行离心10分钟,快速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒与聚合物。
4. 组织匀浆:将组织样本与适量生理盐水混合并捣碎,随后以3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如样本未立即检测,请按单次用量分装并置于-20℃冷冻,尽量避免反复冻融。解冻时应在室温下进行,确保样品充分均匀解冻。
在操作过程中,需遵循以下注意事项以确保实验结果的可靠性。试剂盒包含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备:20×洗涤缓冲液需按1:20比例稀释,即将1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水中。
结果判断:需在Excel中建立标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,通过曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:本试剂盒的性能和结果仅供研究使用,不应用于临床诊断。