尊龙凯时内毒素(ET)蛋白溶液的ELISA实验流程

中文

English

尊龙凯时内毒素(ET)蛋白溶液的ELISA实验流程

发布时间:2025-03-10   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒专为科学研究而设计,禁止用于医学诊断。该内毒素(ET) Elisa试剂盒旨在有效检测蛋白溶液中的adropin(AD),以下是详细的使用说明。

尊龙凯时内毒素(ET)蛋白溶液的ELISA实验流程

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。使用时,将样品、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育和彻底洗涤后,应用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再在酸性环境中转化为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。收集血液后,进行3000转/分钟离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。

2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转/分钟离心30分钟后取上清液。

3. 细胞上清液:将样品以3000转/分钟离心10分钟,去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,然后进行3000转/分钟离心10分钟,取上清液。

5. 保存:如样本收集后未及时检测,请按一次用量分装并在-20℃冷冻保存,避免反复冻融,并确保在室温下均匀解冻样品。

操作注意事项

本试剂盒包括不同浓度的标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液需稀释为1:20,即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水中。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,然后根据曲线方程计算各样本的浓度。

免责声明

对试剂盒性能不做任何保证,本产品仅供科学研究用途,不得用于临床诊断。使用时请遵循相关规范,以确保实验的准确性和有效性。

选择尊龙凯时,让您的实验更具优越性和可靠性!