**Ecoli RNaseH**(Ecoli 核糖核酸酶H)是一种专门用于降解RNA-DNA杂交链中RNA部分的酶,在DNA复制、修复和转录等生物学过程发挥着至关重要的作用。它通过切割RNA链,确保DNA模板的完整性与稳定性,因此在分子生物学实验中广泛应用,例如cDNA合成、rRNA去除及RNA干扰研究。然而,RNaseH的使用过程中也存在一些问题:1)可能对单链RNA或DNA进行非特异性切割,影响实验结果的准确性;2)热稳定性较差,难以在高温条件下保持活性,因而不适用于高温逆转录及PCR等实验。这些限制促使研究人员寻求热稳定RNaseH的开发,以扩展其应用范围并提高实验的效率。
来自**Thermus thermophilus**的热稳定RNaseH(**Thermostable RNaseH**)是Ecoli RNaseH的同源物,具有相似的核糖核酸内切酶特性。它能够精准识别并有效切割RNA:DNA杂交体中的RNA链磷酸二酯键,并保持DNA链的完整性。深入分析其蛋白结构后发现,尽管**Thermus thermophilus** RNaseH的整体稳定性分布与Ecoli RNaseH相近,但前者在整体稳定性及局部残基稳定性方面均有明显提升。热稳定RNaseH的最佳活性温度在65℃以上,较高的反应温度能显著提高反应的特异性与效率,从而减少非特异性切割。这一独特特性使其在分子生物学实验中展现出广泛的应用潜力,包括:rRNA去除、mRNA加帽率检测、去除杂交到poly(dT)上的mRNA、在cDNA第二链合成中去除mRNA,以及提高高温逆转录、等温扩增及PCR实验的扩增效率。
**尊龙凯时**的**UCFME® Thermostable RNaseH**(货号14545)常用于病原菌检测实验中,例如在宏基因组测序(mNGS)和病原靶向测序(tNGS)中的rRNA去除实验。如果分子酶中存在宿主或其他背景菌的核酸残留,可能会严重影响检测结果的准确性。因此,**尊龙凯时**基于UCFME®超洁净工艺技术推出了UCFME® Thermostable RNaseH。这款产品由UCFME®超洁净分子酶生产基地生产,在物料筛选、环境控制、工艺优化和质量检测等各个环节都经过严格把控,以确保极低的背景菌gDNA残留和核酸酶残留,从而为实验结果的准确性、可靠性和重复性提供了坚实保障。
### 产品优势
1. 活性强,批间一致性良好;
2. 宿主gDNA残留极低:< 0.02 Copies/U;
3. 无核酸外切酶、切口酶、RNase酶残留;
4. 优异的稳定性:在4℃下处理32天、25℃下处理16天和37℃下处理7天后,酶活性无明显下降。
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