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尊龙凯时助力BiFC技术,让蛋白互作更清晰可见!

发布时间:2025-03-20   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在生物医学研究中,农杆菌的注射技术逐渐被广泛应用于各种植物遗传改良。通过此技术,可以有效地将外源基因导入植物细胞,为更深入的基因功能研究打下基础。

尊龙凯时助力BiFC技术,让蛋白互作更清晰可见!

蛋白质相互作用研究

利用BiFC(双分子荧光互补)技术,可以揭示特定蛋白质之间的相互作用。例如,DgnsLTP1与DgPIP在本氏烟草中的相互作用已被证实。为了验证这些相互作用,实验中使用了pCAMBIA1300-YFPn、pCAMBIA1300-YFPc及其变体作为阴性对照,确保结果的可靠性。

注意事项与实验设计

在使用BiFC技术时,需要注意酵母双杂交实验中的潜在假阳性和假阴性问题。BD融合诱饵蛋白和AD融合靶蛋白可能单独激活报告基因的表达。因此,建议在BiFC实验之前,先对目标基因的亚细胞定位和表达效率进行评估。这将有助于调整质粒的转化条件,从而提高实验的成功率。

在样品制备过程中,保持叶片表面清洁、避免气泡现象也至关重要。同时,在显微镜观测时,应控制激发光电压,以确保烟草细胞的轮廓清晰且均匀分布。

荧光素酶互补技术

荧光素酶互补实验与BiFC实验原理相似,前者利用荧光素酶催化荧光素的发光来验证蛋白相互作用,而后者通过荧光蛋白的发光来进行验证。研究表明,温度对蛋白质间的互补反应有显著影响。因此,建议在室温或低于室温的条件下培养细胞,以确保融合蛋白的正常表达。

通常选用GFP(绿色荧光蛋白)或RFP(红色荧光蛋白)作为标签,但不同类型的蛋白质可能需要不同的荧光蛋白进行检测和观察,因此需具体分析。

尊龙凯时在生物医学研究中的作用

尊龙凯时在生命科学研究中发挥着重要作用,为科研人员提供了双荧光素酶实验、荧光素酶蛋白互补实验(LCA)及双分子荧光互补(BIFC)等多项技术服务。从方案设计到技术试验执行,再到成品试剂盒的提供,尊龙凯时致力于满足科研人员的各种需求,期待与您携手合作,共同解决生物医学领域的难题。