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尊龙凯时电泳缓冲液、染料与凝胶配制指南

发布时间:2025-03-31   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在生物医学实验中,电泳缓冲液是必不可少的试剂,其中包括50× Tris-乙酸(TAE)和5× Tris-硼/酸(TBE)缓冲液的制备。本文将展示这些缓冲液的配制方法。

尊龙凯时电泳缓冲液、染料与凝胶配制指南

50× Tris-乙酸(TAE)缓冲液配制

要配制1L的50× TAE缓冲液,所需成分及用量如下:

  • 2 mol/L Tris碱 - 242g
  • 1 mol/L 乙酸 - 571ml的冰乙酸(174 mol/L)
  • 100 mmol/L EDTA(pH 8.0) - 200ml的0.5 mol/L EDTA
  • 去离子水 - 补足至1L

5× Tris-硼/酸(TBE)缓冲液配制

为制备1L的5× TBE缓冲液,需按以下比例添加成分:

  • 445 mmol/L Tris碱 - 54g
  • 445 mmol/L 硼酸盐 - 275g
  • 10 mmol/L EDTA(pH 8.0) - 20ml的0.5 mol/L EDTA
  • 去离子水 - 补足至1L

染料配制

配制染料是优化电泳过程中的重要一步:

凝胶上样液配制

以下是几种凝胶上样液的制备方法:

6×碱性凝胶上样液

  • 03N氢氧化钠 - 6mmol/L
  • 18%聚蔗糖(400型) - 0.15%
  • 0.5%溴甲/酚绿 - 0.25%
  • 0.5%二甲/苯青FF - 0.15%
  • 去离子水 - 300ul
  • 10N氢氧化钠 - 120ul
  • 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) - 18g
  • 补足至10ml

6×聚蔗糖凝胶上样液

  • 0.15%溴酚蓝
  • 0.15%二甲/苯青FF
  • 5mmol/L EDTA
  • 15%聚蔗糖(400型)
  • 去离子水 - 15ml
  • 1%溴酚蓝 - 15ml
  • 1%二甲/苯青FF - 100ul
  • 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) - 15g
  • 补足至10ml

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在实验室中合理地配制和使用电泳缓冲液,可以大幅提高实验结果的可靠性和重复性。希望本篇文章能对您的研究有所帮助!